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NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)應(yīng)用在水稻中的操作流程

水稻是我國重要的糧食作物之一。受限于人口壓力，可耕種面積減少以及自然災(zāi)害等壓力，培育高產(chǎn)抗病蟲害的水稻品種是提高水稻產(chǎn)量的重要環(huán)節(jié)。隨著基因編輯技術(shù)的快速發(fā)展，分子生物學(xué)技術(shù)滲透到農(nóng)業(yè)育種的方方面面。所以轉(zhuǎn)基因指標(biāo)的檢測，分子標(biāo)記育種等手段都需要進(jìn)行基因組DNA檢測。但是面對大量待篩選樣本，例如葉片、種子等，就目前實(shí)驗(yàn)室提取基因組DNA的技術(shù)手段而言效率太低。無論是使用CTAB法還是硅膠柱提取法，光液氮研磨就占據(jù)了工作量的一般，從而使整個(gè)提取純化過程費(fèi)時(shí)費(fèi)力。從而大大降低了實(shí)驗(yàn)室研究人員的積極性。

從經(jīng)濟(jì)角度考慮，目前應(yīng)用于水稻中提取基因組DNA的方法主要為CTAB法。該方法局限性很大，例如取材量大、液氮研磨、步驟多、提取時(shí)間長、使用不易購買的有毒有害試劑，反復(fù)離心，且無法高通量操作。隨著田間出樣量逐年增加，該方法已經(jīng)不能滿足實(shí)驗(yàn)室需求，我司開發(fā)的NuSmart^®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒一次性解決以上痛點(diǎn)問題。

—對樣本量要求低、微量（1-4mm葉片）

—操作簡單快速（5分鐘釋放基因組DNA）

—室溫處理

—不用液氮研磨

—不用離心

—不使用生物酶，如蛋白酶K

—不使用有毒有害有機(jī)試劑

操作流程

案例A 不同生長時(shí)間采集水稻葉片擴(kuò)增2個(gè)基因

1、幼苗期 2、插秧期 3、分蘗期 4、拔節(jié)期

使用NuSmart^®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒（貨號Nu-GR01）處理幼苗期、插秧期、分蘗期、拔節(jié)期葉片，2×GMO Mix擴(kuò)增2個(gè)不同長度基因，分別為482bp（基因1）和134bp（基因2）。

案例B 水稻不同大小葉片擴(kuò)增2個(gè)基因

幼苗期葉片長度1:1mm    2:2mm    3:3mm    4:4mm

成熟期葉片直徑1:1mm    2:2mm    3:3mm    4:4mm

使用NuSmart^®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒（貨號Nu-GR01）處理幼苗期和成熟期葉片，2×GMO Mix擴(kuò)增2個(gè)不同長度基因，分別為482bp（基因1）和134bp（基因2）。

案例C 水稻不同部位樣品擴(kuò)增2個(gè)基因

1、葉片 2、莖 3、根 4、花蕊 5、種子

使用NuSmart^®轉(zhuǎn)基因水稻快速PCR試劑盒（貨號Nu-GR01）處理根、莖、葉、花蕊、種子，2×GMO Mix擴(kuò)增2個(gè)不同長度基因，分別為482bp（基因1）和134bp（基因2）。