成人精品视频一区二区三区尤物,91麻豆精品国产91久久久蜜臀,麻豆AV色成人,人爽人澡人妻A片精品二区

技術(shù)文章您的位置:網(wǎng)站首頁 >技術(shù)文章 > 從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項
從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項
更新時間:2020-12-11   點擊次數(shù):1346次
  從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項
  瓊脂糖是從瓊脂中提取出來的,其中含有較多的酸根和羥基多糖。目前大多數(shù)級別的瓊脂糖中含有硫酸酯多糖,這種物質(zhì)能抑制基因克隆中使用的多種工具酶的活性,如DNA限制性內(nèi)切酶、連接酶等,在回收DNA時應(yīng)盡量減少這些物質(zhì)的污染。
  在分子生物學實驗中,我們通常需要分離純化特定分子量的DNA片段,用于接下來的實驗,比如酶切、連接的工作。下面主要介紹從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項,其主要原則有兩項:
  1、去除DNA樣品中的雜質(zhì):
  瓊脂糖是從瓊脂中提取出來的,其中含有較多的酸根和羥基多糖。目前大多數(shù)級別的瓊脂糖中含有硫酸酯多糖,這種物質(zhì)能抑制基因克隆中使用的多種工具酶的活性,如DNA限制性內(nèi)切酶、連接酶等,在回收DNA時應(yīng)盡量減少這些物質(zhì)的污染。不管用哪種方法進行回收DNA,都會用到2.5 mol/L醋酸銨和乙醇沉淀,再用70%乙醇漂洗數(shù)次,這樣處理,可以有效地去除一些有害的有機分子和無機鹽沉淀。近年來瓊脂糖的質(zhì)量大為提高,出現(xiàn)了如低熔點瓊脂糖這樣的產(chǎn)品,不但熔點降低,其中含有的對DNA工具酶有抑制作用的物質(zhì)也很少,所以有些低熔點的瓊脂糖可以直接在其溶液中對DNA進行內(nèi)切酶消化和DNA片段之間的連接反應(yīng)。
  2、提高DNA片段的回收率:
  DNA的回收率與DNA片段的大小有一定關(guān)系,分子量越大,回收率明顯下降,大于20kb時,回收率低于20%。這是由于大的DNA片段和DEAE纖維素紙的結(jié)合力強,很難洗脫下來。DNA片段的含量也和回收率有較為密切的關(guān)系,量越少回收率越低。
  回收DNA片段時應(yīng)注意以下事項:
  1、提高DNA上樣量;
  2、減小DNA回收時的洗脫容積,若容積過大,可先用正丁醇進行濃縮;
  3、正確選擇回收DNA片段的方法,根據(jù)回收片段的大小選擇適當?shù)幕厥辗椒ā?/div>
©2025  上海創(chuàng)凌生物科技有限公司 All Rights Reserved.  網(wǎng)站地圖  滬ICP備2023009255號-1  管理登陸  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)
在線客服 二維碼

掃一掃,關(guān)注我們

日韩A久久| 日本一道二区三区我不卡| 人妻夜夜爽一区| 象A一区欧美大片| 国偷精品乱码一区二区三区在线观看 | 日本无码乱伦一区二区三区| 青青97在线| 中文字幕制服丝袜资源站| 黄色3D在线视频观看| 久久人人妻人人人人妻性色| 國產精品亂碼一區二區視頻| 搞鸡巴好爽视频| xxx.久久久久久久久| 麻豆免费成人av| 超碰福利2025av亚洲| 亚洲精品自在| 啊啊啊好大好爽哦还要视频| 日韩精品干逼视频| 夫妻原创自拍 av xyt| 欧美成人专区在线观看| 中美乱伦一区二区| 免费无遮挡 视频网站三D| 久久人人爽www天天人人爽| 黄色女人麻豆| 日韩欧美臿蕉视频| 白本三级视频| 人人超人人超碰国产| 无码免费2019| 干b免费视频| 70老熟妇另类| 亚洲AV无码国产精品fc2| 青青草成人黄色最新版| 日本一射少妇| 欧美精品综合无码| 久久精品噜噜噜成人看免费漫画| 自拍偷拍三级片在线观看视频| 中国家妇一区二区| 欧美二级黄毛片| 婷婷综性网| 国产精品情趣视频网站| 在线观看免费视频网国产福利|